1936年天皇敕令建立了731部队,全名为日本关东军驻满洲第731防疫给水部队,由石井四郎担任部队长。731部队假借水净化为名,使用健康人体进行生化武器实验。这里的实验手段极其残忍,注射病毒、活体解剖、冻伤、毒气等灭绝人性的实验被应用到活人身上。731部队少将川岛清曾在审判庭上供述:“从来都没有一个人能活着走出这个杀人工厂。”据日本作家森村诚一在《恶魔的饱食》中称,通过“特别输送”进入到731部队的“马路大(被用作实验的活人)”需要进行编号,据统计,从1939年到抗战结束时,共计有3000人死于此。但一些研究表明超过一万的中国人在人体实验中被害。日本投降前夕,为销毁罪证,石井四郎下令炸毁了平房总部,大肆屠杀马路大,并释放病毒和带菌动物,给当地人民带来了巨大灾难。
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